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如何看待PCR試劑盒的“更新換代”?

瀏覽次數:106發布日期:2020-10-23
   自PCR試劑盒技術作為臨床診斷方法以來,實驗室污染一直是影響檢測質量的罪魁禍首。雖經多次技術改進和換代,實驗室污染就像冬季的霧霾很難徹底去除,如果不進行嚴格的污染監控,幾乎所有的核酸提取儀器都會淪陷。
  PCR技術的更新換代,似乎都遵循了這樣一個規律,那就是新一代試劑盒或多或少會解決上一代技術存在的問題,如檢測敏感性逐漸得到提升、檢測步驟逐漸得到簡化、實驗室污染逐漸得到控制。
  一代試劑盒采用電泳法進行結果鑒定,那時實驗室人員對污染還沒有清楚的認識,當從“飲水中”也擴增出“結核桿菌”時,才意識到問題的嚴重性,于是暫停PCR技術在臨床診斷中的應用。人們把污染的癥結歸為“電泳”二字,隨后出現了“ELISA-PCR”或雜交梳等核酸檢測方法,由于同樣是產物開放性鑒定,并沒有改變污染成災的事實,反而使人們對PCR技術能否用于臨床診斷產生質疑。
  二代熒光PCR技術的產生,由之前的開放性核酸鑒定方法,變成由熒光染料或Taq MAN探針為信號源的閉管鑒定,避免了擴增產物外泄的實時熒光PCR技術,事實證明實驗室污染并沒有得到完全控制,一些研究人員認為煮沸得來的核酸干擾物質太多,是影響檢測敏感性的主要原因。
  三代試劑盒“微量核酸釋放劑”法操作簡單、快速,很受實驗室人員歡迎,但實驗室污染也并未因此得到解決。
  之后出現的四、五代試劑盒技術出現解決了往代試劑盒存在的缺陷,是為臨床熒光PCR技術的一場革命。
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