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PCR試劑盒的注意事項,使用方法及用途

瀏覽次數:123發布日期:2021-03-02
   PCR試劑盒使用注意事項:
  注意事項一:保存;未拆封的試劑盒,請于-20℃保存;拆封之后,應在4℃保存,在試劑消耗量較少的實驗室,可以考慮將試劑盒的按照組分單獨分裝,后保存在-20℃。
  注意事項二:配置;試劑盒內所含各組份都是混合物,在靜置情況下會發生分層現象,因此,試劑盒現配現用,震蕩混勻,避免反復凍融,避免預混。其中,反復凍融將大幅縮短試劑盒使用壽命。在擴增體系的選擇時,盡量選擇標準體系,再根據檢材情況加入模板,之后切勿忘記以PCR用水補足擴增體系。
  注意事項三:切勿預混;因PCR試劑盒中酶的活性較高,將各組份按照比例混合之后,即使沒有達到它的適合溫度,但也可能發生與引物結合,導致實驗結果出現丟位點或者雜合子純化等情況。
  PCR試劑盒的方法和用途:
  1.支原體常規PCR檢測試劑盒(一步法)
  1)適合科研單位檢測,或單位內檢,用PCR法檢測細胞或其他生物基質。
  2) 比藥典操作標準合并了一步,(將內控對照試劑預先混合在PCR mix試劑中),操作更簡潔。
  3)樣本量為2μl,靈敏度為20個基因組拷貝/反應。結果準確。
  2.支原體常規PCR檢測試劑盒(經典法,不含Taq酶)
  1) 符合歐洲藥典、中國藥典要求,更適合細胞治療,CAR-T,抗體藥、疫苗等臨床項目申報和質檢。
  2)樣本需先做DNA抽提。抽提后樣本加入量為10μl。
  3)試劑盒中不含Taq酶,需另外購買。
  4) 廠家可協助完善方法驗證步驟。
 
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